革兰氏的染色步骤是：制片、初染、媒染、脱色、复染、镜检。
1、制片，取菌种培养物常规涂片、干燥、固定。
2、初染，滴加结晶紫（以刚好将菌膜覆盖为宜）染色1-2min，水洗。
3、媒染，用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约1min，水洗。
4、脱色，用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴管流加95%的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗。脱色时间一般为20-30s。
5、复染，用番红液复染约2min，水洗。
6、镜检，干燥后，用油镜观察。菌体被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌，被染成红色的为革兰氏阴性菌。
